La centrifugazione separa le particelle in un liquido, guidata dalla forza centrifuga generata dalla rotazione del liquido ad alta velocità in un rotore. Mentre il rotore gira, le particelle più dense si spostano verso il fondo del tubo, mentre i componenti più leggeri si spostano verso l'alto. Le provette da centrifuga sono progettate specificatamente per resistere a queste forze senza rompere o contaminare il campione. Le due dimensioni più comuni per le fiale da centrifuga sono la provetta da centrifuga da 50 ml e la provetta da centrifuga da 15 ml.
Separare le cellule da una soluzione.
Chiarire i liquidi rimuovendo i precipitati.
Isolare DNA, proteine o altre biomolecole.
Eseguire separazioni di siero o plasma dal sangue.
Le provette per centrifuga da laboratorio variano ampiamente in base al materiale, alla capacità del volume e alle specifiche di progettazione per supportare vari tipi di campioni e forze di centrifugazione.
Polipropilene: offre eccellente resistenza chimica e durata, comunemente utilizzato per la centrifugazione ad alta velocità.
Policarbonato: noto per essere trasparente, ma non altrettanto resistente agli agenti chimici.
Vetro: adatto per determinate applicazioni ma più fragile durante la centrifugazione ad alta velocità.
Dimensioni delle provette: concentrandosi su provette da centrifuga da 50 ml e 15 ml
La provetta da centrifuga da 50 ml e la provetta da centrifuga da 15 ml sono comunemente utilizzate per la centrifugazione di routine grazie alla loro capacità versatile per una varietà di tipi di campioni.
Diversi tipi di campioni e protocolli di laboratorio richiedono la centrifugazione per tipi specifici di provette, in particolare quelle che richiedono una separazione netta di liquidi e particolati.
Le provette per la raccolta del sangue sono spesso codificate a colori in base agli additivi:
Queste provette per sangue devono essere centrifugate per la separazione del siero o del plasma, garantendo risultati analitici precisi nei test clinici.
I campioni di urina possono richiedere la centrifugazione per separare cellule e detriti dal fluido. Le provette utilizzate nell'analisi delle urine sono generalmente piccole, con una capacità simile a quella delle provette da centrifuga da 15 ml, sebbene il volume possa variare.
I campioni di piccole dimensioni o quelli che necessitano di fiale da centrifuga ad alta velocità vengono spesso collocati in provette per microcentrifuga (generalmente da 0,5 ml a 2 ml di volume). Queste provette vengono spesso centrifugate per l'analisi del DNA, dell'RNA e delle proteine, dove sono comuni volumi di campione ridotti.
Negli studi biologici e biochimici, le provette per colture cellulari potrebbero richiedere la centrifugazione per far sedimentare le cellule per ulteriori analisi. In genere, viene utilizzata una provetta da centrifuga da 50 ml, poiché consente di elaborare un volume maggiore, rendendola ideale per esperimenti su larga scala o per coltivare quantità di cellule più grandi.
Sapere quando e come centrifugare la provetta da centrifuga da 50 ml o la provetta da centrifuga da 15 ml è fondamentale per evitare la contaminazione del campione, la rottura della provetta o risultati imprecisi.
Per garantire una corretta centrifugazione:
Bilanciare la centrifuga: bilanciare sempre il rotore con provette di uguale volume una di fronte all'altra. Se si dispone di una sola provetta da centrifuga da 50 ml o da 15 ml, riempirne un'altra della stessa dimensione con un volume uguale di acqua o tampone come contrappeso.
Utilizzare rotori e adattatori adatti: alcuni rotori sono progettati specificamente per la provetta da centrifuga da 50 ml e la provetta da centrifuga da 15 ml. Utilizzare adattatori appropriati quando necessario per evitare di danneggiare il rotore o la provetta.
Separazione del sangue e del siero: centrifugare le provette per il prelievo del sangue a velocità moderate (ad es. 1.000–2.000 g) per circa 10–15 minuti per separare efficacemente il siero o il plasma.
Pellettizzazione delle colture cellulari: potrebbero essere necessarie velocità più elevate (ad esempio, 5.000–8.000 g) per pellettizzare le cellule in una provetta da centrifuga da 50 ml, ma ciò dipenderà dal tipo di cellula.
Precipitazione dell'acido nucleico: per la precipitazione del DNA o dell'RNA in provette da centrifuga da 15 ml, è possibile utilizzare velocità di 10.000 go più, a seconda della sensibilità del campione e dei requisiti specifici del protocollo.
Di seguito sono riportati alcuni protocolli standard che richiedono la provetta da centrifuga da 50 ml e la provetta da centrifuga da 15 ml:
Isolamento del siero o del plasma: il sangue raccolto nelle provette con separatore di siero può essere centrifugato in provette da 15 ml o 50 ml.
Protocolli di lisi ed estrazione cellulare: comuni nella biologia molecolare, questi protocolli di fiale da centrifuga richiedono in genere una centrifugazione ad alta velocità per separare i componenti cellulari.
La manipolazione delle provette da centrifuga da 50 ml e da 15 ml in una centrifuga richiede il rispetto di specifiche pratiche di sicurezza per garantire l'affidabilità dei risultati e la longevità dell'attrezzatura.
Prima di ogni centrifugazione:
Ispeziona i tubi per individuare eventuali crepe o imperfezioni, soprattutto se sono stati riutilizzati.
Controllare il rotore per eventuali danni o residui che potrebbero alterare l'equilibrio o danneggiare le provette.
Etichettare chiaramente la provetta da centrifuga da 50 ml e la provetta da centrifuga da 15 ml con i dettagli del campione. Ciò riduce al minimo il rischio di contaminazione incrociata e di identificazione errata durante e dopo la centrifugazione.
Utilizzare provette con tappi sigillati per prevenire la formazione di aerosol, che è particolarmente critica quando si centrifugano campioni biologici. Per alcuni protocolli, per evitare fuoriuscite, possono essere preferibili provette da centrifuga specializzate con tappi a vite.
La provetta da centrifuga da 50 ml e la provetta da centrifuga da 15 ml sono strumenti versatili ampiamente utilizzati nei laboratori per applicazioni che vanno dal trattamento dei campioni di sangue all'estrazione del DNA. Scegliere la provetta giusta, bilanciarla correttamente e selezionare le impostazioni di centrifugazione corrette sono passaggi fondamentali per una centrifugazione di successo. Comprendendo i requisiti di queste provette e i diversi protocolli che richiedono la centrifugazione, sarai ben attrezzato per ottenere risultati accurati e affidabili in laboratorio.

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