Les pipettes doivent être stockées verticalement, elles ont donc besoin d'un support de pipette ou d'un support de pipette pour empêcher tout liquide résiduel à l'intérieur de l'instrument de couler dans les parois intérieures, ce qui pourrait provoquer de la corrosion. Ce support pour pipettes garantit également que le lubrifiant du piston à l'intérieur du corps de la pipette reste uniformément réparti.
10 conseils pour le stockage
Assurer l'équilibre de la température :Assurez-vous que la pipette, les pointes et les liquides sont à température ambiante, si l'expérience le permet.
Maintenir un angle de pipette constant :Tenez la pipette à un angle stable, ne dépassant pas 20 degrés.
Aspirez correctement :Plongez les embouts juste sous la surface du liquide (2-3 mm) lors de l'aspiration.
Toucher après la distribution :Touchez la pointe de la pipette après chaque distribution avant de la retirer du récipient cible.
Pré-mouillez la pointe de la pipette :Aspirez et distribuez le volume nominal trois fois pour pré-humidifier l'embout.
Optimiser la plage de volume :Utilisez la pipette entre 35 et 100 % de son volume nominal pour une meilleure précision.
Jeter la première et la dernière distribution :Lors de la distribution de plusieurs aliquotes, jetez la première et la dernière distribution.
Manipuler des liquides visqueux :Pipetez les liquides visqueux à des vitesses plus lentes et utilisez le mode « Pipette inversée ».
Manipuler des liquides volatils :Pipetez rapidement les liquides volatils et utilisez le mode « Pipette inversée ».
Calibrer en fonction de la densité du liquide :Recalibrez la pipette si vous utilisez un liquide dont la densité est sensiblement différente de celle de l'eau.
Avant de commencer
Assurer l’équilibre de la température
Pour améliorer l'exactitude et la précision avec une pipette à déplacement d'air, assurez-vous que la pipette, les pointes et les liquides sont équilibrés à température ambiante, si l'expérience le permet.
Précisionfait référence à la mesure dans laquelle le volume distribué correspond au volume réglé. Cela dépend de l’étalonnage et de la technique de la pipette.
Précisionindique la cohérence du volume sur plusieurs distributions. Il peut être amélioré grâce à des pratiques de pipetage appropriées.
Note:Les différences de température peuvent provoquer la contraction ou l'expansion du coussin d'air à l'intérieur de la pointe de la pipette et de la pipette, ce qui peut nuire à l'exactitude et à la précision du volume distribué.
Comment pipeter
Maintenir la cohérenceP.Ipette Angle
Lors du pipetage, il est essentiel de maintenir un angle constant pour obtenir des résultats précis. Si possible, maintenez la pipette à un angle constant tout au long du processus, idéalement ne dépassant pas 20 degrés. Pour les très petits volumes de 30 microlitres ou moins, il est préférable de tenir la pipette aussi droite que possible.
Note:La modification de l'angle affecte la pression hydrostatique à l'intérieur de l'embout, entraînant des volumes d'aspiration incohérents.
Comment aspirer
Une erreur courante lors de l’aspiration consiste à immerger la pointe de la pipette trop profondément dans le récipient source. Cela augmente le risque que des gouttelettes de liquide s'accrochent à l'extérieur de la pointe. Pour éviter cela, plongez l'embout juste en dessous de la surface du liquide, idéalement à 2-3 mm, pour aspirer avec précision le volume souhaité. Une exception concerne l’aspiration de volumes extrêmement faibles, tels que 0,2 microlitre.
Note:Le liquide retenu à l’extérieur de l’embout peut entraîner une distribution imprécise.
Toucher après la distribution
Après la distribution, vous remarquerez peut-être une gouttelette à l’extrémité de l’embout. Pour garantir une distribution précise, utilisez l’une des méthodes suivantes pour retirer la pipette du récipient cible :
Toucher la paroi latérale :
Retirez la pointe de la pipette en la faisant glisser le long de la paroi latérale du récipient. Cette méthode standard est recommandée pour obtenir des distributions précises.
Toucher la surface désactivé :
Retirez l'embout en touchant la gouttelette de liquide à la surface du liquide dans le récipient. Cette technique convient pour distribuer moins de 1 microlitre pour un transfert soigné. Toucher la gouttelette avec le liquide retire la petite gouttelette de la pointe de la pipette, garantissant ainsi une distribution précise.
Dans la distribution de liquide :
Si la distribution s'effectue directement dans le liquide, elle est considérée comme une distribution humide et un contact n'est pas nécessaire. Cette méthode est idéale pour la distribution de petits volumes afin d'éviter que le liquide ne reste sur le côté du récipient.
Note:Le liquide résiduel s'accroche souvent à l'extrémité de la pointe après une distribution. Les techniques mentionnées éliminent efficacement ce liquide résiduel de la pointe.
Optimisation des performances de pipetage
Pré-humide
Après avoir chargé les embouts sur votre pipette, aspirez et distribuez le volume nominal trois fois. Ce processus permet d'égaliser les différences de température et d'humidifier l'espace d'air mort à l'intérieur de la pipette et de la pointe. Négliger cette procédure de pré-mouillage peut avoir pour conséquence que les distributions initiales délivrent moins de volume en raison de l'évaporation.
Note:L'évaporation peut entraîner la formation de gouttelettes à l'extrémité de la pointe à mesure que la pression de vapeur augmente, forçant le liquide à sortir de la pointe.
Optimiser la plage de volumes
La plage de volumes de votre pipette influence considérablement à la fois l'exactitude et la précision. Les pipettes à déplacement d'air démontrent des performances optimales lorsqu'elles sont utilisées entre 35 % et 100 % de leur volume nominal. Plus votre volume de distribution est proche du volume total de la pipette, plus vos résultats seront fiables. Lors d'un fonctionnement inférieur à 35 %, le volume d'air mort dans la pipette augmente considérablement, augmentant ainsi le risque de distribution inexacte et imprécise. De plus, travailler dans la plage de volumes recommandée minimise le recours à la technique et diminue les erreurs liées à l'utilisateur.
Jeter la première et la dernière distribution
Lors de l’utilisation du mode de distribution répétée d’une pipette électronique, il est conseillé d’exclure la première et la dernière aliquote de la série. Voici la justification de cette recommandation :
Transition mécanique :Une fois l’aspiration du liquide terminée, les mécanismes internes de la pipette nécessitent un changement de direction avant de lancer la distribution. Cette transition peut conduire à ce que la distribution initiale contienne un volume inférieur à celui prévu.
Variation de précision :Aucune pipette n'atteint une précision de 100 %, ce qui signifie que chaque distribution peut s'écarter légèrement du volume cible. Par conséquent, la dernière distribution accumule les erreurs de toutes les distributions précédentes.
Note:En raison de ces facteurs, les première et dernière distributions sont susceptibles de contenir les erreurs les plus significatives et doivent être omises du test.
Liquides visqueux
Le pipetage d’échantillons visqueux présente des défis uniques en raison de leur lente absorption dans la pointe et de leur tendance à adhérer à la paroi de la pointe pendant la distribution, en raison de leur faible élasticité. Pour relever ces défis efficacement, envisagez les techniques suivantes :
Ajuster la vitesse :Aspirez et distribuez des échantillons visqueux à des vitesses plus lentes. De plus, une brève pause après chaque aspiration ou distribution donne au liquide plus de temps pour entrer ou sortir en douceur de l'embout.
Utiliser le mode « Pipette inversée » :Pour atténuer le risque de distribution de volumes trop faibles en raison d'un liquide adhérant à la paroi intérieure de la pointe, utilisez le mode « Pipette inversée ». Ce mode aspire le volume souhaité plus une distribution supplémentaire qui sera rejetée, compensant tout liquide retenu. Un avantage supplémentaire du pipetage inversé est l’absence de soufflage à la fin, empêchant les liquides visqueux de mousser ou de former des bulles d’air.
Liquides volatils
Pipeter avec précision des liquides volatils peut poser des problèmes en raison de leur évaporation rapide par rapport aux solutions aqueuses, conduisant souvent à des pointes qui gouttent. Pour éviter ce problème, procédez comme suit :
Conseils pour pipettes pré-humides :Humidifiez l’espace d’air mort en pré-mouillant la pointe de la pipette. Cela implique d'aspirer et de distribuer trois fois tout le volume de votre embout en utilisant le liquide que vous allez pipeter.
Utiliser le mode « Pipette inversée » :Lors du pipetage de solutions volatiles, utilisez le mode « Pipette inversée ». Ce mode intègre un volume d'échantillon plus important, minimisant ainsi l'impact de l'évaporation sur le volume réel à délivrer. De plus, pipetez rapidement les liquides volatils pour réduire davantage l’évaporation pendant le processus de pipetage.
Calibrer en fonction de la densité du liquide
Des imprécisions substantielles peuvent survenir lors du pipetage de liquides s'écartant des solutions aqueuses. Il est impératif de recalibrer votre pipette lorsque la densité du liquide diffère considérablement de celle de l'eau.
Note:Les pipettes sont testées et étalonnées en usine avec de l'eau distillée à température ambiante. Le pipetage de liquides de densités variables peut entraîner des distributions imprécises en raison de cette inadéquation d’étalonnage.
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