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PусскийLas pipetas deben almacenarse en posición vertical, por lo que necesitan un soporte para pipetas o un soporte para pipetas para evitar que el líquido residual dentro del instrumento fluya hacia las paredes internas, lo que puede causar corrosión. Esta rejilla para pipetas también garantiza que el lubricante del pistón dentro del cilindro de la pipeta permanezca distribuido uniformemente.
10 consejos para almacenar
Garantizar el equilibrio de temperatura:Asegúrese de que la pipeta, las puntas y los líquidos estén a temperatura ambiente, si el experimento lo permite.
Mantenga un ángulo de pipeta constante:Sostenga la pipeta en un ángulo estable, que no exceda los 20 grados.
Aspirar adecuadamente:Sumerja las puntas justo debajo de la superficie del líquido (2-3 mm) al aspirar.
Retoque después de dispensar:Quite la punta de la pipeta después de cada dispensación antes de retirarla del recipiente de destino.
Humedezca previamente la punta de la pipeta:Aspire y dispense el volumen nominal tres veces para humedecer previamente la punta.
Optimice el rango de volumen:Utilice la pipeta entre el 35 y el 100 % de su volumen nominal para obtener la mejor precisión.
Descartar el primer y último dispensado:Al dispensar varias alícuotas, deseche la primera y la última dispensación.
Manejar líquidos viscosos:Pipetee líquidos viscosos a velocidades más lentas y utilice el modo "Pipeta inversa".
Manejar líquidos volátiles:Pipetee líquidos volátiles rápidamente y utilice el modo "Pipeta inversa".
Calibrar según la densidad del líquido:Vuelva a calibrar la pipeta si utiliza un líquido con una densidad significativamente diferente a la del agua.
Antes de que empieces
Garantizar el equilibrio de temperatura
Para mejorar la exactitud y precisión con una pipeta de desplazamiento de aire, asegúrese de que la pipeta, las puntas y los líquidos estén equilibrados a temperatura ambiente, si el experimento lo permite.
Exactitudse refiere a qué tan cerca coincide el volumen dispensado con el volumen establecido. Depende de la calibración y la técnica de la pipeta.
Precisiónindica la consistencia del volumen en múltiples dispensaciones. Se puede mejorar con prácticas de pipeteo correctas.
Nota:Las diferencias de temperatura pueden hacer que el colchón de aire dentro de la punta de la pipeta y la pipeta se contraiga o expanda, lo que puede afectar negativamente a la exactitud y precisión del volumen dispensado.
Cómo pipetear
Mantener consistentePAGÁngulo de ipeta
Al pipetear, mantener un ángulo constante es fundamental para lograr resultados precisos. Si es posible, mantenga la pipeta en un ángulo constante durante todo el proceso, idealmente no superior a 20 grados. Para volúmenes muy pequeños de 30 microlitros o menos, es mejor mantener la pipeta lo más recta posible.
Nota:Cambiar el ángulo afecta la presión hidrostática dentro de la punta, lo que genera volúmenes de aspiración inconsistentes.
Cómo aspirar
Un error común durante la aspiración es sumergir la punta de la pipeta demasiado profundamente en el recipiente de origen. Esto aumenta el riesgo de que gotas de líquido se adhieran al exterior de la punta. Para evitar esto, sumerja la punta justo debajo de la superficie del líquido, idealmente 2-3 mm, para aspirar el volumen deseado con precisión. Una excepción es cuando se aspiran volúmenes extremadamente pequeños, como 0,2 microlitros.
Nota:El líquido retenido en el exterior de la punta puede provocar una dosificación inexacta.
Apagar después de dispensar
Después de dispensar, es posible que observe una gota en el extremo de la punta. Para garantizar una dosificación precisa, utilice uno de los siguientes métodos para retirar la pipeta del recipiente de destino:
Toque de pared lateral desactivado:
Retire la punta de la pipeta deslizándola a lo largo de la pared lateral del recipiente. Se recomienda este método estándar para lograr dispensaciones precisas.
Toque de superficie desactivado:
Retire la punta tocando la gota de líquido en la superficie del líquido en el recipiente. Esta técnica es adecuada para dispensar menos de 1 microlitro para una transferencia ordenada. Al tocar el líquido con la gota, se elimina la pequeña gota de la punta de la pipeta, lo que garantiza una entrega precisa.
En dispensación de líquido:
Si la dispensación se realizó directamente en el líquido, se considera una dispensación húmeda y no es necesario tocarlo. Este método es ideal para dispensar volúmenes pequeños para evitar que quede líquido en el costado del recipiente.
Nota:El líquido residual a menudo se adhiere al extremo de la punta después de una dispensación. Las técnicas mencionadas eliminan eficazmente este líquido residual de la punta.
Optimización del rendimiento del pipeteo
Pre-mojado
Después de cargar las puntas en la pipeta, aspire y dispense el volumen nominal tres veces. Este proceso ayuda a igualar las diferencias de temperatura y humidificar el espacio de aire muerto dentro de la pipeta y la punta. Si se descuida este procedimiento de humectación previa, las dispensaciones iniciales pueden producir menos volumen debido a la evaporación.
Nota:La evaporación puede provocar la formación de gotas en el extremo de la punta a medida que aumenta la presión del vapor, lo que obliga al líquido a salir de la punta.
Optimice el rango de volumen
El rango de volumen de su pipeta influye significativamente tanto en la exactitud como en la precisión. Las pipetas de desplazamiento de aire demuestran un rendimiento óptimo cuando se utilizan entre el 35 % y el 100 % de su volumen nominal. Cuanto más cerca esté el volumen de dispensación del volumen total de la pipeta, más fiables serán los resultados. Cuando se opera por debajo del 35 %, el volumen de aire muerto dentro de la pipeta aumenta sustancialmente, lo que aumenta la probabilidad de una dosificación inexacta e imprecisa. Además, trabajar dentro del rango de volumen recomendado minimiza la dependencia de la técnica y disminuye los errores relacionados con el usuario.
Desechar el primer y el último suministro
Cuando se utiliza el modo de dispensación repetida de una pipeta electrónica, es aconsejable excluir la primera y la última alícuota de la serie. Aquí está el fundamento detrás de esta recomendación:
Transición mecánica:Al finalizar la aspiración de líquido, los mecanismos internos de la pipeta requieren un cambio de dirección antes de iniciar la dispensación. Esta transición puede provocar que la dispensación inicial contenga un volumen inferior al previsto.
Variación de precisión:Ninguna pipeta logra una precisión del 100%, lo que significa que cada dispensación puede desviarse ligeramente del volumen objetivo. En consecuencia, la última dispensación acumula los errores de todas las dispensaciones anteriores.
Nota:Debido a estos factores, la primera y la última dispensación tienden a contener los errores más importantes y deben omitirse del ensayo.
Líquidos Viscosos
Pipetear muestras viscosas presenta desafíos únicos debido a su lenta absorción en la punta y la tendencia a adherirse a la pared de la punta durante la dispensación, debido a su baja elasticidad. Para abordar estos desafíos de manera efectiva, considere las siguientes técnicas:
Ajustar velocidad:Aspire y dispense muestras viscosas a velocidades más lentas. Además, hacer una pausa breve después de cada aspiración o dispensación permite que el líquido tenga más tiempo para entrar o salir suavemente de la punta.
Utilice el modo "Pipeta inversa":Para mitigar el riesgo de dispensar volúmenes demasiado bajos debido a que el líquido se adhiere a la pared interior de la punta, utilice el modo "Pipeta inversa". Este modo aspira el volumen deseado más una dosificación adicional que se desechará, compensando cualquier líquido retenido. Una ventaja adicional del pipeteo inverso es la ausencia de escape al final, lo que evita que los líquidos viscosos formen espuma o burbujas de aire.
Líquidos volátiles
Pipetear líquidos volátiles con precisión puede plantear desafíos debido a su rápida evaporación en comparación con las soluciones acuosas, lo que a menudo conduce a puntas que gotean. Para evitar este problema, siga estos pasos:
Puntas de pipeta prehumedecidas:Humedezca el espacio de aire muerto humedeciendo previamente la punta de la pipeta. Esto implica aspirar y dispensar el volumen total de la punta tres veces utilizando el líquido que pipeteará.
Utilice el modo "Pipeta inversa":Al pipetear soluciones volátiles, utilice el modo "Pipeta inversa". Este modo incorpora un volumen de muestra mayor, minimizando el impacto de la evaporación en el volumen real a entregar. Además, pipetee líquidos volátiles rápidamente para reducir aún más la evaporación durante el proceso de pipeteo.
Calibrar según la densidad del líquido
Pueden surgir importantes imprecisiones al pipetear líquidos que divergen de soluciones acuosas. Es imperativo recalibrar la pipeta cuando la densidad del líquido difiere significativamente de la del agua.
Nota:Las pipetas se prueban y calibran en fábrica utilizando agua destilada a temperatura ambiente. Pipetear líquidos con diferentes densidades puede provocar dispensaciones inexactas debido a esta discrepancia en la calibración.
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