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Pусскийपिपेट को सीधा संग्रहित करने की आवश्यकता होती है, इसलिए उन्हें उपकरण के अंदर किसी भी अवशिष्ट तरल को आंतरिक दीवारों में जाने से रोकने के लिए पिपेट धारक या पिपेट स्टैंड की आवश्यकता होती है, जो जंग का कारण बन सकता है। यह पिपेट रैक यह भी सुनिश्चित करता है कि पिपेट बैरल के अंदर पिस्टन स्नेहक समान रूप से वितरित रहे।
भंडारण के लिए 10 युक्तियाँ
तापमान संतुलन सुनिश्चित करें:यदि प्रयोग अनुमति देता है तो सुनिश्चित करें कि पिपेट, टिप्स और तरल पदार्थ कमरे के तापमान पर हैं।
लगातार पिपेट कोण बनाए रखें:पिपेट को एक स्थिर कोण पर पकड़ें, 20 डिग्री से अधिक नहीं।
ठीक से महाप्राण करें:एस्पिरेट करते समय युक्तियों को तरल की सतह (2-3 मिमी) के ठीक नीचे डुबोएं।
वितरण के बाद स्पर्श करें:लक्ष्य पात्र से निकालने से पहले प्रत्येक वितरण के बाद पिपेट टिप को स्पर्श करें।
पिपेट टिप को पहले से गीला करें:टिप को पूर्व-गीला करने के लिए नाममात्र मात्रा को तीन बार एस्पिरेट करें और वितरित करें।
वॉल्यूम रेंज अनुकूलित करें:सर्वोत्तम सटीकता के लिए पिपेट का उपयोग उसकी नाममात्र मात्रा के 35-100% के भीतर करें।
पहला और आखिरी वितरण त्यागें:एकाधिक अंशों का वितरण करते समय, पहले और अंतिम वितरण को त्याग दें।
चिपचिपे तरल पदार्थों को संभालें:चिपचिपे तरल पदार्थों को धीमी गति से पिपेट करें और "रिवर्स पिपेट" मोड का उपयोग करें।
अस्थिर तरल पदार्थों को संभालें:पिपेट वाष्पशील तरल पदार्थों को जल्दी से पिपेट करें और "रिवर्स पिपेट" मोड का उपयोग करें।
तरल घनत्व के आधार पर अंशांकन करें:यदि पानी से काफी भिन्न घनत्व वाले तरल का उपयोग कर रहे हैं तो पिपेट को पुन: कैलिब्रेट करें।
आपके शुरू करने से पहले
तापमान संतुलन सुनिश्चित करें
वायु विस्थापन पिपेट के साथ सटीकता और परिशुद्धता बढ़ाने के लिए, यदि प्रयोग अनुमति देता है, तो सुनिश्चित करें कि पिपेट, टिप्स और तरल पदार्थ कमरे के तापमान पर संतुलित हों।
शुद्धतासंदर्भित करता है कि वितरित मात्रा निर्धारित मात्रा से कितनी निकटता से मेल खाती है। यह पिपेट अंशांकन और तकनीक पर निर्भर करता है।
शुद्धताएकाधिक डिस्पेंस पर वॉल्यूम की स्थिरता को इंगित करता है। सही पिपेटिंग प्रथाओं से इसे बेहतर बनाया जा सकता है।
टिप्पणी:तापमान अंतर के कारण पिपेट टिप और पिपेट के अंदर एयर कुशन सिकुड़ या फैल सकता है, जो वितरित मात्रा की सटीकता और परिशुद्धता पर प्रतिकूल प्रभाव डाल सकता है।
पिपेट कैसे करें
निरंतरता बनाए रखेंपीआईपेट कोण
पिपेटिंग करते समय, सटीक परिणाम प्राप्त करने के लिए एक सुसंगत कोण बनाए रखना महत्वपूर्ण है। यदि संभव हो, तो पूरी प्रक्रिया के दौरान पिपेट को एक स्थिर कोण पर रखें, आदर्श रूप से 20 डिग्री से अधिक नहीं। 30 माइक्रोलीटर या उससे कम की बहुत छोटी मात्रा के लिए, पिपेट को यथासंभव सीधा पकड़ना सबसे अच्छा है।
टिप्पणी:कोण बदलने से टिप के अंदर हाइड्रोस्टैटिक दबाव प्रभावित होता है, जिससे आकांक्षा की मात्रा असंगत हो जाती है।
महाप्राण कैसे करें
आकांक्षा के दौरान एक सामान्य गलती पिपेट टिप को स्रोत बर्तन में बहुत गहराई तक डुबाना है। इससे तरल बूंदों के सिरे के बाहर चिपकने का खतरा बढ़ जाता है। इसे रोकने के लिए, टिप को तरल की सतह के ठीक नीचे डुबोएं, आदर्श रूप से 2-3 मिमी, वांछित मात्रा को सटीक रूप से अवशोषित करने के लिए। एक अपवाद तब होता है जब अत्यंत कम मात्रा में, जैसे कि 0.2 माइक्रोलीटर, एस्पिरेट किया जाता है।
टिप्पणी:टिप के बाहर तरल पदार्थ जमा रहने से गलत वितरण हो सकता है।
वितरण के बाद स्पर्श करें
वितरण के बाद, आप टिप सिरे पर एक बूंद देख सकते हैं। सटीक वितरण सुनिश्चित करने के लिए, लक्ष्य पोत से पिपेट को हटाने के लिए निम्नलिखित तरीकों में से एक का उपयोग करें:
साइड वॉल टच ऑफ:
पिपेट टिप को बर्तन की साइडवॉल के साथ सरकाकर हटा दें। सटीक वितरण प्राप्त करने के लिए इस मानक विधि की अनुशंसा की जाती है।
सतह स्पर्श बंद:
कंटेनर में तरल की सतह पर तरल की बूंद को छूकर टिप को हटा दें। यह तकनीक साफ-सुथरे स्थानांतरण के लिए 1 माइक्रोलीटर से कम का वितरण करने के लिए उपयुक्त है। तरल पदार्थ में बूंद को छूने से पिपेट टिप से छोटी बूंद निकल जाती है, जिससे सटीक वितरण सुनिश्चित होता है।
तरल वितरण में:
यदि डिस्पेंस सीधे तरल में था, तो इसे गीला-डिस्पेंस माना जाता है, और टच-ऑफ अनावश्यक है। यह विधि बर्तन के किनारे तरल पदार्थ को बचे रहने से रोकने के लिए छोटी मात्रा में वितरण के लिए आदर्श है।
टिप्पणी:वितरण के बाद अवशिष्ट तरल अक्सर टिप सिरे पर चिपक जाता है। उल्लिखित तकनीकें टिप से इस अवशिष्ट तरल को प्रभावी ढंग से हटा देती हैं।
पिपेटिंग प्रदर्शन का अनुकूलन
पहले से गीला
अपने पिपेट पर टिप्स लोड करने के बाद, नाममात्र मात्रा को तीन बार एस्पिरेट करें और वितरित करें। यह प्रक्रिया तापमान के अंतर को बराबर करने और पिपेट और टिप के अंदर मृत वायु स्थान को आर्द्र करने में मदद करती है। इस पूर्व-गीला प्रक्रिया की उपेक्षा करने से वाष्पीकरण के कारण प्रारंभिक वितरण कम मात्रा में हो सकता है।
टिप्पणी:वाष्पीकरण के कारण टिप सिरे पर बूंदें बन सकती हैं क्योंकि वाष्प का दबाव बढ़ जाता है, जिससे तरल टिप से बाहर निकल जाता है।
वॉल्यूम रेंज को अनुकूलित करें
आपके पिपेट की वॉल्यूम रेंज सटीकता और परिशुद्धता दोनों को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करती है। वायु विस्थापन पिपेट इष्टतम प्रदर्शन प्रदर्शित करते हैं जब उनकी नाममात्र मात्रा के 35% और 100% के बीच उपयोग किया जाता है। आपके वितरण की मात्रा कुल पिपेट मात्रा के जितनी करीब होगी, आपके परिणाम उतने ही अधिक विश्वसनीय होंगे। 35% से नीचे संचालन करते समय, पिपेट के भीतर मृत हवा की मात्रा काफी बढ़ जाती है, जिससे गलत और सटीक वितरण की संभावना बढ़ जाती है। इसके अलावा, अनुशंसित वॉल्यूम सीमा के भीतर काम करने से तकनीक पर निर्भरता कम हो जाती है और उपयोगकर्ता-संबंधी त्रुटियां कम हो जाती हैं।
पहला और आखिरी वितरण त्यागें
इलेक्ट्रॉनिक पिपेट के रिपीट डिस्पेंस मोड का उपयोग करते समय, श्रृंखला के पहले और आखिरी एलिकोट्स को बाहर करने की सलाह दी जाती है। इस अनुशंसा के पीछे तर्क यह है:
यांत्रिक संक्रमण:तरल आकांक्षा के पूरा होने पर, पिपेट के आंतरिक तंत्र को वितरण शुरू करने से पहले एक दिशात्मक परिवर्तन की आवश्यकता होती है। इस परिवर्तन के कारण आरंभिक वितरण में इच्छित मात्रा से कम मात्रा हो सकती है।
सटीकता भिन्नता:कोई भी पिपेट 100% सटीकता प्राप्त नहीं करता है, जिसका अर्थ है कि प्रत्येक वितरण लक्ष्य मात्रा से थोड़ा भिन्न हो सकता है। नतीजतन, अंतिम डिस्पेंस पिछले सभी डिस्पेंस से त्रुटियों को जमा करता है।
टिप्पणी:इन कारकों के कारण, पहली और आखिरी डिस्पेंस में सबसे महत्वपूर्ण त्रुटियां होने की संभावना है और इसे परख से हटा दिया जाना चाहिए।
चिपचिपा तरल पदार्थ
पिपेटिंग चिपचिपे नमूने टिप में धीमी गति से ग्रहण करने और वितरण के दौरान टिप की दीवार से चिपकने की प्रवृत्ति के कारण, उनकी कम लोच के कारण अद्वितीय चुनौतियाँ प्रस्तुत करते हैं। इन चुनौतियों से प्रभावी ढंग से निपटने के लिए निम्नलिखित तकनीकों पर विचार करें:
गति समायोजित करें:धीमी गति से एस्पिरेट करें और चिपचिपे नमूने वितरित करें। इसके अतिरिक्त, प्रत्येक आकांक्षा या वितरण के बाद थोड़ी देर रुकने से तरल को टिप में आसानी से प्रवेश करने या बाहर निकलने के लिए अधिक समय मिलता है।
"रिवर्स पिपेट" मोड का उपयोग करें:टिप की अंदर की दीवार पर तरल चिपकने के कारण बहुत कम मात्रा में वितरण के जोखिम को कम करने के लिए, "रिवर्स पिपेट" मोड को नियोजित करें। यह मोड वांछित मात्रा के साथ-साथ एक अतिरिक्त वितरण भी प्रदान करता है जिसे छोड़ दिया जाएगा, जिससे किसी भी बरकरार तरल की भरपाई हो जाएगी। रिवर्स पिपेटिंग का एक अतिरिक्त लाभ अंत में ब्लो-आउट की अनुपस्थिति है, जो चिपचिपे तरल पदार्थों को झाग बनने या हवा के बुलबुले बनने से रोकता है।
वाष्पशील तरल पदार्थ
वाष्पशील तरल पदार्थों को सटीक रूप से पिपेट करने से जलीय घोल की तुलना में उनके तेजी से वाष्पीकरण के कारण चुनौतियाँ पैदा हो सकती हैं, जिससे अक्सर युक्तियाँ टपकने लगती हैं। इस समस्या को रोकने के लिए, इन चरणों का पालन करें:
पूर्व-गीला पिपेट युक्तियाँ:पिपेट टिप को पहले से गीला करके मृत वायु स्थान को नम करें। इसमें आपके द्वारा पिपेट किए जाने वाले तरल पदार्थ का उपयोग करके आपकी टिप की पूरी मात्रा को तीन बार एस्पिरेट करना और वितरित करना शामिल है।
"रिवर्स पिपेट" मोड का उपयोग करें:अस्थिर समाधानों को पाइप करते समय, "रिवर्स पिपेट" मोड को नियोजित करें। यह मोड एक बड़ी नमूना मात्रा को शामिल करता है, जिससे वितरित की जाने वाली वास्तविक मात्रा पर वाष्पीकरण का प्रभाव कम हो जाता है। इसके अतिरिक्त, पिपेटिंग प्रक्रिया के दौरान वाष्पीकरण को और कम करने के लिए पिपेट वाष्पशील तरल पदार्थों को तेजी से बढ़ाता है।
तरल घनत्व के आधार पर अंशांकन करें
जब पिपेटिंग तरल पदार्थ जलीय घोल से अलग हो जाते हैं तो पर्याप्त अशुद्धियाँ उत्पन्न हो सकती हैं। जब तरल का घनत्व पानी से काफी भिन्न हो तो अपने पिपेट को पुन: अंशांकित करना अनिवार्य है।
टिप्पणी:पिपेट को कमरे के तापमान पर आसुत जल का उपयोग करके कारखाने में परीक्षण और अंशांकन से गुजरना पड़ता है। अलग-अलग घनत्व वाले तरल पदार्थों को पिपेट करने से इस अंशांकन बेमेल के कारण गलत वितरण हो सकता है।
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