As pipetas precisam ser armazenadas na vertical, por isso precisam de um suporte ou suporte de pipeta para evitar que qualquer líquido residual dentro do instrumento escorra para as paredes internas, o que pode causar corrosão. Este suporte de pipetas também garante que o lubrificante do pistão dentro do corpo da pipeta permaneça distribuído uniformemente.
10 dicas para armazenar
Garanta o equilíbrio da temperatura:Certifique-se de que a pipeta, as pontas e os líquidos estejam à temperatura ambiente, se o experimento permitir.
Mantenha um ângulo de pipeta consistente:Segure a pipeta em um ângulo constante, não superior a 20 graus.
Aspire corretamente:Mergulhe as pontas logo abaixo da superfície do líquido (2-3 mm) ao aspirar.
Toque após a distribuição:Toque na ponta da pipeta após cada distribuição antes de removê-la do recipiente alvo.
Pré-molhe a ponta da pipeta:Aspire e distribua o volume nominal três vezes para umedecer previamente a ponta.
Otimize a faixa de volume:Use a pipeta entre 35-100% do seu volume nominal para melhor precisão.
Descarte a primeira e a última dispensa:Ao dispensar múltiplas alíquotas, descarte a primeira e a última dispensa.
Manuseie líquidos viscosos:Pipete líquidos viscosos em velocidades mais lentas e use o modo "Pipetagem reversa".
Manuseie líquidos voláteis:Pipete líquidos voláteis rapidamente e use o modo "Pipetagem reversa".
Calibrar com base na densidade do líquido:Recalibre a pipeta se estiver usando um líquido com densidade significativamente diferente da água.
Antes que você comece
Garanta o equilíbrio de temperatura
Para aumentar a exatidão e a precisão com uma pipeta de deslocamento de ar, certifique-se de que a pipeta, as pontas e os líquidos estejam equilibrados à temperatura ambiente, se o experimento permitir.
Precisãorefere-se à proximidade entre o volume dispensado e o volume definido. Depende da calibração e da técnica da pipeta.
Precisãoindica a consistência do volume em múltiplas dispensas. Pode ser melhorado com práticas corretas de pipetagem.
Observação:As diferenças de temperatura podem fazer com que a almofada de ar dentro da ponta da pipeta e da pipeta se contraia ou se expanda, o que pode afetar negativamente a exatidão e a precisão do volume dispensado.
Como Pipetar
Manter consistentePângulo ipette
Ao pipetar, manter um ângulo consistente é crucial para obter resultados precisos. Se possível, mantenha a pipeta num ângulo constante durante todo o processo, idealmente não excedendo 20 graus. Para volumes muito pequenos de 30 microlitros ou menos, é melhor segurar a pipeta o mais reto possível.
Observação:A alteração do ângulo afeta a pressão hidrostática dentro da ponta, levando a volumes de aspiração inconsistentes.
Como aspirar
Um erro comum durante a aspiração é mergulhar a ponta da pipeta muito profundamente no recipiente de origem. Isto aumenta o risco de gotículas de líquido aderirem à parte externa da ponta. Para evitar isso, mergulhe a ponta logo abaixo da superfície do líquido, idealmente 2-3 mm, para aspirar com precisão o volume desejado. Uma exceção é ao aspirar volumes extremamente baixos, como 0,2 microlitros.
Observação:O líquido retido na parte externa da ponta pode causar uma distribuição imprecisa.
Toque após dispensar
Após a distribuição, você poderá notar uma gota na ponta. Para garantir uma distribuição precisa, utilize um dos seguintes métodos para remover a pipeta do recipiente alvo:
Toque na parede lateral desligado:
Remova a ponta da pipeta deslizando-a ao longo da parede lateral do recipiente. Este método padrão é recomendado para obter dispensas precisas.
Toque de superfície desligado:
Remova a ponta tocando a gota de líquido na superfície do líquido no recipiente. Esta técnica é adequada para dispensar menos de 1 microlitro para uma transferência perfeita. Tocar a gota no líquido remove a pequena gota da ponta da pipeta, garantindo uma entrega precisa.
Na distribuição de líquidos:
Se a dispensação foi diretamente no líquido, é considerada uma dispensação úmida e o toque é desnecessário. Este método é ideal para distribuição de pequenos volumes para evitar que o líquido permaneça na lateral do recipiente.
Observação:O líquido residual geralmente gruda na ponta após a distribuição. As técnicas mencionadas removem eficazmente este líquido residual da ponta.
Otimizando o desempenho da pipetagem
Pré-molhado
Depois de colocar as pontas na pipeta, aspire e distribua o volume nominal três vezes. Este processo ajuda a equalizar as diferenças de temperatura e a umedecer o espaço de ar morto dentro da pipeta e da ponta. Negligenciar este procedimento de pré-umedecimento pode fazer com que as dispensas iniciais forneçam menos volume devido à evaporação.
Observação:A evaporação pode levar à formação de gotículas na extremidade da ponta à medida que a pressão do vapor aumenta, forçando o líquido para fora da ponta.
Otimize a faixa de volume
A faixa de volume da sua pipeta influencia significativamente a exatidão e a precisão. As pipetas de deslocamento de ar demonstram desempenho ideal quando usadas entre 35% e 100% do seu volume nominal. Quanto mais próximo o volume de distribuição estiver do volume total da pipeta, mais confiáveis serão os resultados. Ao operar abaixo de 35%, o volume de ar morto dentro da pipeta aumenta substancialmente, aumentando a probabilidade de distribuição imprecisa e imprecisa. Além disso, trabalhar dentro da faixa de volume recomendada minimiza a confiança na técnica e diminui os erros relacionados ao usuário.
Descarte a primeira e a última dispensa
Ao utilizar o modo de distribuição repetida de uma pipeta eletrônica, é aconselhável excluir a primeira e a última alíquotas da série. Aqui está a justificativa por trás desta recomendação:
Transição Mecânica:Após a conclusão da aspiração do líquido, os mecanismos internos da pipeta requerem uma mudança de direção antes de iniciar a distribuição. Esta transição pode fazer com que a distribuição inicial contenha um volume inferior ao pretendido.
Variação de precisão:Nenhuma pipeta atinge 100% de precisão, o que significa que cada distribuição pode desviar-se ligeiramente do volume alvo. Consequentemente, a última dispensa acumula os erros de todas as dispensações anteriores.
Observação:Devido a estes fatores, a primeira e a última dispensa são propensas a conter os erros mais significativos e devem ser omitidas do ensaio.
Líquidos Viscosos
A pipetagem de amostras viscosas apresenta desafios únicos devido à sua absorção lenta pela ponta e à tendência de aderir à parede da ponta durante a distribuição, devido à sua baixa elasticidade. Para enfrentar esses desafios de forma eficaz, considere as seguintes técnicas:
Ajustar velocidade:Aspire e distribua amostras viscosas em velocidades mais lentas. Além disso, fazer uma breve pausa após cada aspiração ou distribuição permite que o líquido tenha mais tempo para entrar ou sair suavemente da ponta.
Utilize o modo "Pipetagem reversa":Para mitigar o risco de dispensar volumes muito baixos devido à aderência do líquido à parede interna da ponta, utilize o modo "Pipetagem reversa". Este modo aspira o volume desejado mais uma dispensa adicional que será descartada, compensando qualquer líquido retido. Uma vantagem adicional da pipetagem reversa é a ausência de sopro na extremidade, evitando que líquidos viscosos formem espuma ou formem bolhas de ar.
Líquidos Voláteis
A pipetagem precisa de líquidos voláteis pode representar desafios devido à sua rápida evaporação em comparação com soluções aquosas, muitas vezes levando a pontas gotejantes. Para evitar esse problema, siga estas etapas:
Pontas de pipeta pré-molhadas:Umidifique o espaço de ar morto umedecendo previamente a ponta da pipeta. Isso envolve aspirar e dispensar o volume total da ponta três vezes usando o líquido que você irá pipetar.
Utilize o modo "Pipetagem reversa":Ao pipetar soluções voláteis, utilize o modo "Pipetagem reversa". Este modo incorpora um volume de amostra maior, minimizando o impacto da evaporação no volume real a ser fornecido. Além disso, pipete líquidos voláteis rapidamente para reduzir ainda mais a evaporação durante o processo de pipetagem.
Calibrar com base na densidade do líquido
Podem surgir imprecisões substanciais ao pipetar líquidos que divergem de soluções aquosas. É imperativo recalibrar sua pipeta quando o líquido diferir significativamente em densidade da água.
Observação:As pipetas são testadas e calibradas na fábrica com água destilada em temperatura ambiente. Pipetar líquidos com densidades variadas pode levar a dispensas imprecisas devido a essa incompatibilidade de calibração.
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